苦瓜(Momordica charantia L.)是葫蘆科(Cur.cubitaceae)苦瓜屬(Momordica)植物苦瓜的果實,因具有特殊苦昧而得名。近年來,國內外對苦瓜的藥理學和臨床作用進行了大量研究,發現苦瓜對治療燒傷、皮癢、傷口愈合等疾病有很好的療效。苦瓜籽油是利用苦瓜籽提取苦瓜多肽蛋白的副產物,研究發現苦瓜籽油具有抗氧化、抗癌、降血脂等生理功能,目前對這方面的研究也較多,但對苦瓜籽油脂肪酸組成變化等方面的分析研究較少。
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本文采用正丁烷浸提法提取苦瓜籽仁得苦瓜籽油,經氣相色譜分析脂肪酸組成,同時對比新鮮的和放置兩個半月的苦瓜籽油中脂肪酸組成的變化,為苦瓜籽油的開發提供基礎數據,同時為苦瓜籽的綜合利用提供依據。
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1 材料與方法
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1.1 材料、儀器
苦瓜籽(北京某公司),脫殼處理。
脂肪酸甲酯標準品:CLA(9clIt—CLA,8tlOc—CLA,1lcl3t—CLA,10tl2c—CLA),美國Nu—Chek—Prep公司。
乙醚、乙醇、正丁烷、CH3OH、硫酸、硫酸銨、三氟化硼、硫酸銅、無水Na2SO4、HCl、NaOH、韋氏試劑、硫代硫酸鈉、KI、淀粉、酚酞、甲基紅、溴甲酚綠、蔗糖、NaCl均為分析純;異辛烷為色譜純。6980N型氣相色譜儀(Agilent公司),索氏抽提器,旋轉蒸發器,TGL一16C高速離心機,101A一1型電熱鼓風干燥箱,微量凱氏定氮儀,BS 210s電子分析天平,破碎機,水浴鍋,干燥器,60目篩。
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1.2 試驗方法
1.2.1 苦瓜籽理化指標測定
水分及揮發物按照GB/T 14489.1—2008測定,含油量按照GB/T 14488.1-2008測定,粗蛋白按照GB/T 14489.2-2008測定。
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1.2.2 苦瓜籽油提取
將脫殼的苦瓜籽粉碎,過60目篩后,經正丁烷(從提高溶劑的回收率和油脂的提取率角度考慮,本試驗采用正丁烷作為浸提溶劑)溶劑浸提后,減壓蒸發回收溶劑,得苦瓜籽油。
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1.2.3 苦瓜籽油理化指標測定
酸值按GB/T 5530-2005測定,碘值按GB/T5532-2008測定,皂化值按GB/T 5534-2008測定,不皂化物按GB/T 5535-2008測定。
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1.2.4 苦瓜籽油脂肪酸組成分析
1.2.4.1 脂肪酸甲酯化
稱取0.2 g提取的苦瓜籽油,加入0.5 mol/L的NaOH—CH3OH溶液4 mL,置于50 mL的燒瓶中,于60℃ 水浴回流30 min,用移液管從冷凝器頂部加人5 mL 12% 的三氟化硼一甲醇溶液,繼續煮沸30min。再用同樣方法加入3 mL異辛烷,冷卻后加入20 mL飽和NaC1溶液,振蕩后繼續加飽和NaC1溶液至燒瓶頸部,靜置分層。最后取2 mL上層溶液加適量無水Na2SO4 干燥后備用。
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1.2.4.2 氣相色譜分析
分別對新鮮的和放置兩個半月的苦瓜籽油進行氣相色譜測定,分析其脂肪酸組成和含量的變化。氣相色譜條件:色譜柱為CP—Si188熔融石英毛細管柱(100 m×0.25 mm,Chrompack Bridgewater,NJ),N 為載氣,H2、空氣為燃燒氣。FID溫度250℃ ,進樣口溫度250℃ 。程序升溫過程:45℃ 保持3 min后以13~C/min的升溫速率將溫度升至175 ,保持27 min后以4~C/min的升溫速率將溫度升至215 ℃,保持5 min。測定時間為86 min。
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2 結果與分析
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2.1 苦瓜籽理化指標(見表1)
從表1結果可知,苦瓜籽含油量為42.2% ,粗蛋白含量為36.4% 。含油量和粗蛋白含量都較高。
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2.2 苦瓜籽油理化指標
苦瓜籽經正丁烷提取,減壓濃縮得苦瓜籽油,新鮮的苦瓜籽油呈淺黃色液體,冷卻至室溫即呈奶白色固態,具有辣喉味。放置兩個半月后白色固體色澤變黃。這可能是苦瓜籽油的脂肪酸組成發生改變所導致的。
新鮮苦瓜籽油主要理化指標見表2。
從表2可看出,苦瓜籽油的碘值(I)在100—130 g/100 g之間,屬半干性油;苦瓜籽油的皂化值(KOH)小于200 mg/g,根據皂化值和相對分子質量的關系,推測其所含脂肪酸以十八碳脂肪酸為主。
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2.3 苦瓜籽油脂肪酸組成
為了確定新鮮的和放置兩個半月的苦瓜籽油脂肪酸組成和含量是否改變,分別對新鮮的和放置兩個半月的苦瓜籽油進行氣相色譜分析,氣相色譜圖見圖1、圖2,其脂肪酸組成分析結果見表3。
從表3可知,苦瓜籽油含有26種脂肪酸,以多不飽和脂肪酸為主要成分,這與吳丹等報道的苦瓜籽油中含有25種脂肪酸和以單不飽和脂肪酸為主要成分有出入,同時與劉旭慶等報道的各脂肪酸含量也有差異,這可能與苦瓜籽原料的采摘期和油脂提取方法有關。
同時,從表3中可知,新鮮的苦瓜籽油經放置兩個半月后兩種異構體9clltl3t一共軛十八碳三烯酸( α一桐酸)和9tlltl3c一共軛十八碳三烯酸(α一桐酸異構體)的含量變化很大,分別為新鮮的54.26%對應放置兩個半月的35.63% 和新鮮的2.42% 對應放置兩個半月的19.09% 。分析原因可能是經放置后α一桐酸在空氣、日光等作用下不穩定,構型發生變化,從而引起含量上的變化。
研究發現9cl 1 tl3t一共軛十八碳三烯酸是一種主要的共軛亞麻酸(CLN),CLN在體外具有強烈的抗癌活性和降血脂功效。因此,苦瓜籽油具有的抗氧化、抗癌、降血脂作用可能與所含的9clltl3t一共軛十八碳三烯酸有關。
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3 結論
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(1)苦瓜籽仁中含油量為42.2% ,屬于高含油油料。
(2)經氣相色譜分析,苦瓜籽油中共軛十八碳三烯酸的兩種異構體含量在新鮮的和放置兩個半月的變化很大,分析原因可能是旺一桐酸在空氣中不穩定,經放置和日光等作用下轉變為 α一桐酸異構體。
(3)苦瓜籽油所含的α一桐酸是一種主要的共軛亞麻酸(CLN),其具有抗氧化、抗癌、降血脂作用,這為苦瓜籽油在醫藥和保健食品中的應用提供了理論基礎。